وجود خون مخفی در مدفوع انسان می تواند نشان دهنده ی بسیاری از بیماری ها باشد.خون مخفی در مدفوع به عنوان iFOBیا FOB نیز شناخته می شود .در مراحل اولیه مشکلات دستگاه گوارشی مانند : سرطان کولون،زخم معده، بواسیر ،کولیت ،دیورتیوکولیت و زخم هایی که بدون هیچ علت ایجاد می شود با خون مخفی موجود در مدفوع قابل ردیابی می باشد .متدهای مرسوم guaiac-based از حساسیت و اختصاصیت کافی برخوردار نبوده و دارای محدودیت های رژیم غذایی قبل از تست می باشد.آزمایش به روش ساندویچی همراه با 2 آنتی بادی می باشد،که بطور اختصاصی خون مخفی در مدفوع را در غلظت 50 ng/mLیا بالاتر شناسایی می کند.علاوه بر آن،برخلاف تست های guaiac-based صحت تست متاثر از رژیم غذایی بیماران قبل از تست نمی باشد. تست از دو خط برای نشان دادن نتایج استفاده می کند. خط تست حاوی آنتی بادی مونوکلونال ضد هموگلوبین (Anti-Hb) است که به طور اختصاصی وجود هموگلوبین را تشخیص می دهد.خط کنترل از آنتی بادیهای پلی کلونال و ذرات کلوئیدی طلا تشکیل شده است .نمونه به وسیله خاصیت موئینگی در امتداد غشاء حرکت کرده تا با کنژوگه رنگی واکنش نشان دهد.هموگلوبین موجود در نمونه مثبت با کنژوگه رنگی متصل به آنتی بادی ضد Hb واکنش داده و یک خط رنگی در ناحیه خط تست (T)تشکیل می دهد.عدم تشکیل این خط نشان دهنده ی نتیجه منفی است.تشکیل یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل (C) نشان دهنده ی حجم کافی نمونه می باشد. بروز هر شدت رنگ در خط تست نشان دهنده حضور هموگلوبین در نمونه مدفوع بوده و نتیجه تست مثبت می باشد. اگر تنها خط کنترل تشکیل گردد ،نتیجه تست منفی می باشد.در صورتی که خط کنترل تشکیل نگردد نتیجه آزمایش نامعتبر می باشد و باید تست را با یک کاست تست جدید تکرار نمود.
